论文研究 角质酶Est1的热稳定突变体的表达纯化和结晶

双重突变体Est1是在嗜热热菌中的一种可塑性降解的角质酶型酯酶，已在大肠杆菌中过表达。 重组蛋白通过两步纯化，涉及固定化金属亲和色谱和阳离子交换色谱，每升细菌培养物可产生120 mg蛋白。 通过使用落滴蒸气扩散技术获得了晶体。 在SPring-8的BL44XU光束线上从100 K的速冻晶体获得了1.37Å分辨率的原始衍射数据。该晶体属于C2空间群，其晶胞参数a = 127.2Å，b = 42.1Å ，c ＝ 63.2埃，β＝ 114.7°，每个不对称单元可能含有一个Est1双突变体（296个残基）。